本发明涉及一种制备重组人IL-12亲和纯化层析柱的工艺、由该工艺制得的重组人IL-12亲和纯化层析柱、及用该亲和纯化层析柱纯化重组人IL-12的方法。具体地说,本发明涉及用抗人IL-12的杂交瘤细胞株制备抗人IL-12单克隆抗体,并用该抗体制备重组人IL-12亲和纯化层析柱,然后用该亲和纯化层析柱纯化重组人IL-12的工艺流程。更具体地说,本发明涉及一种采用亲和层析柱纯化重组人IL-12的方法,其特征在于用抗人IL-12单克隆抗体的杂交瘤细胞株制备抗体,用该抗体制备人IL-12亲和纯化层析柱,然后以该亲和纯化层析柱为基础进行纯化重组人IL-12的方法。