本发明公开了一种永久性液态微球样品室,包括盖玻片(①)、玻片夹层(②)和载玻片(③);在玻片夹层的中间加工成长方形孔洞,其长度略大于盖玻片长度,以便在腔体两端留出可供进样和出气的端口;玻片夹层有一定的厚度,夹在载玻片和盖玻片之间形成可容纳样品溶液的长条形腔体;利用玻片夹层的热熔性或其自身粘性将盖玻片和载玻片粘结成样品室。本发明可以重复使用,并能长时间储存,其具有良好的化学稳定性以及高低温难受力。该样品室选材和几何尺寸针对常规显微镜观测而设计,能用于绝大部分光学显微实验,可对液体样品进行长时间观察,没有相关经验的用户也可直接使用。本发明不仅限于液态微球样品,也适用于普通常规的所有液态样品。