碱性果胶酶(Alkaline pectate lyase,EC: 4.2.2.2)是一类在碱性条件下催化裂解果胶质主链的酶,主要应用于纺织工业的棉织品精炼、麻类脱胶等领域。
我们通过克隆构建重组大肠杆菌工程菌,该菌的生产水平远高于野生菌。在7 L发酵罐,利用简单的无机盐培养中,采用多阶段分批补料发酵,培养温度和诱导温度分别为37℃和30℃,发酵周期为30小时,最终实现胞外表达,高达4000 U/mL以上。与国内相关技术相比,本技术具有高生产水平(提高了2~4倍)、发酵周期短、操作简单、发酵条件易于实现、成本低廉等优势,将有益于拓展棉织品的生物精炼的市场。本项目技术包括两种碱性果胶酶(PelB、PelN)的发酵技术,两株工程菌都达到高产酶水平,诱导方式包括IPTG和乳糖诱导方式。