专利详情

专利名称	一种用于新一代测序分析的多重目的DNA片段富集方法
申请号	CN201210253791.X	专利类型	发明专利
公开（公告）号	CN103571822A	公开（授权）日	2014.02.12
申请（专利权）人	中国科学院植物研究所	发明（设计）人	漆小泉;池旭;张英春
主分类号	C12N15/10(2006.01)I	IPC主分类号	C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I
专利有效期	一种用于新一代测序分析的多重目的DNA片段富集方法至一种用于新一代测序分析的多重目的DNA片段富集方法	法律状态	实质审查的生效
说明书摘要	本发明公开了一种DNA测序模板的制备方法。该方法包括如下步骤：（1）将待测序的DNA分子依次进行片段化、末端修复和补齐，3’端加A，以及连接接头；（2）通过三轮半巢式PCR扩增富集目的DNA片段；前两次PCR所用引物均为一条特异性引物和一条通用引物；第三次PCR所用引物由两条通用引物组成；前两次PCR可为多重PCR反应。与Illumina?GA样品前处理过程相比，本发明所提供的方法减少了样品处理的步骤，节约了时间和经济成本，同时降低了起始DNA样品的需求量；最重要的是，循环数的降低和Phusion高保真DNA聚合酶的使用降低了由于PCR而引入的突变，使得对所得数据的处理变得相对简单清晰，同时本方法在应用到各种重测序的实验中时对测序深度的要求也降低。