专利详情

专利名称	利用慢病毒载体介导RNAi的方法
申请号	CN201110110644.2	专利类型	发明专利
公开（公告）号	CN102206645A	公开（授权）日	2011.10.05
申请（专利权）人	中国科学院武汉病毒研究所	发明（设计）人	胡康洪;王薇薇;彭洪泉
主分类号	C12N15/113(2010.01)I	IPC主分类号	C12N15/113(2010.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N33/569(2006.01)I
专利有效期	利用慢病毒载体介导RNAi的方法至利用慢病毒载体介导RNAi的方法	法律状态	实质审查的生效
说明书摘要	本发明是一种利用慢病毒载体介导RNAi的方法，具体是：先对相关病毒的核酸序列进行同源性分析，找出保守区域，设计出针对相关病毒保守区域的siRNA；将siRNA克隆到表达质粒pLVTH后，再与pCMV-dR8.91、pMD2.G共同转染293T细胞中，收集转染后细胞上清，经超速离心、纯化、浓缩后形成了表达siRNA的高滴度的慢病毒载体，然后将其与LV-tTR-KRAB共转导入靶细胞，并且利用四环素类似物DOX来严格控制siRNA药物作用的时间及剂量。本发明因其高效的转导率及严格的控制体系可以真实的评价siRNA在体内的抗病毒作用，同时可以追踪药物干扰作用的全过程，从而为临床提供了使用前景。