专利详情

专利名称	一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用
申请号	CN201110093484.5	专利类型	发明专利
公开（公告）号	CN102191213A	公开（授权）日	2011.09.21
申请（专利权）人	中国科学院武汉病毒研究所	发明（设计）人	危宏平;赵金凤;王殿冰;张治平;张先恩
主分类号	C12N1/21(2006.01)I	IPC主分类号	C12N1/21(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12Q1/66(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N
专利有效期	一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用至一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用	法律状态	实质审查的生效
说明书摘要	本发明一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用，包括步骤：1.突变酶突变位点的引入：2．鉴定重组质粒；3．测序，获得带有1060位突变位点的PCR片段；4．经胶回收纯化后，用限制性内切酶，获得大肠杆菌；5．鉴定重组质粒，得到一种分离的蛋白基因；6．培养大肠杆菌；7．将重组质粒转化BL21感受态细胞，得到表达突变酶的菌株；8．将上述获得的BL21表达菌株培养；9．将5蛋白的菌液离心，再通过超声破碎，离心获取上清；10．测定，获得有高热稳定性又有高酶活的萤火虫荧光素酶。一种萤火虫荧光素酶的基因在食品、医药、菌体检测上的应用。该突变酶的发光强度是野生型的15-20倍左右，并且较野生型具有良好的热稳定性。