专利详情

专利名称	用于检测环境中类雌激素化合物的双杂交酵母以及生物测试方法
申请号	CN200710308509.2	专利类型	发明专利
公开（公告）号	CN101469315	公开（授权）日	2009.07.01
申请（专利权）人	中国科学院生态环境研究中心	发明（设计）人	王子健;李剑;马梅;饶凯锋
主分类号	C12N1/19(2006.01)I	IPC主分类号	C12N1/19(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I;C12R1/865(2006.01)N
专利有效期	用于检测环境中类雌激素化合物的双杂交酵母以及生物测试方法至用于检测环境中类雌激素化合物的双杂交酵母以及生物测试方法	法律状态	实质审查的生效
说明书摘要	本发明提供一种用于检测环境样品中类雌激素化合物的双杂交酵母及其制备方法，其中该酵母中含有pGBKT7-ER酵母表达质粒和 pGAD424-GRIP1酵母表达质粒，其中pGBKT7-hER酵母表达质粒包含雌激素受体基因，pGAD424-GRIP1酵母表达质粒包含具有如SEQ ID No.2 所示序列的雌激素受体共激活因子基因片段。本发明还提供了一种检测环境中类雌激素化合物的生物测试方法，其中包括将上述双杂交酵母细胞与待测样品共培养，加入邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷的反应液进行反应，根据终止反应后检测到的上清液在420nm处的吸光度值来计算类雌激素化合物的浓度。本发明采用重组雌激素受体基因的双杂交酵母用于测试，更加接近哺乳动物内分泌系统的真实作用情况，构建的酵母细胞基因性状稳定，易于培养、筛选，整个类雌激素效应的筛选过程操作简单，所需样品量少，成本低廉。